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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時(shí)間:2017-12-27
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
品牌 | BIM | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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牛分泌型球蛋白A(sIgA)elisa試劑盒哪家好
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
牛分泌型球蛋白A(sIgA)elisa試劑盒哪家好特點(diǎn)概述
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置
8、*,質(zhì)量保證,zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
ELISA試劑盒檢測(cè)概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)過程:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
四、常見問題解答
小編簡(jiǎn)單整理了5個(gè)問題,具體內(nèi)容如下:
1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來算,定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè),zui多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本;48T的zui多30個(gè)樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?
96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請(qǐng)教一下,我想用elisa法測(cè)血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對(duì)自己包被(查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會(huì)不會(huì)比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心,可以自己購買抗體對(duì)自己包被,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。
不過ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。