產品型號：6-K-PG

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2016-04-20

產品簡介：

【產品名稱】：大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒

【檢測方法】：酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

【產品性狀】：96T/48T，盒裝液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa試劑盒二年，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購買。

【主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。

【標    本】：血清/血漿/細胞培養上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物

【質量承諾】：我們堅持對產品質量作不斷的評估、創新和改善以確保您對我們產品的高度信任。

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

【樣品采集】：Elisa試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

【保 質 期】：半年(六個月)

一、實驗原理：

大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒原理

ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

二、實驗過程：

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標儀讀數。

三、大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒注意事項

1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。

2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

3. 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。

5. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。

6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請避光保存。

8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

四、ELISA試劑盒優點：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等，品種具備以下優點：

*品質—高品質的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎

精確特異—特異檢測目標分子，結果精確可重復

高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標

種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬

優化設計—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細胞培養物樣本檢測進行優化

五、常見問題解答

小編簡單整理了5個問題，具體內容如下：

1、一個大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒檢測幾個樣品？

小編自己在各大論壇看到zui多的三個答案：

1）48T 可做42個樣本加6個標準曲線；96T 可做90個樣本加6個標準曲線

2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢測，zui多還能檢測80個標本；48T的zui多30個樣本。

2、大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？

96T，一般做復孔的話，做標準曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發現沒有現成的試劑盒用，現在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產的試劑盒可靠呢？

如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；

另外國內還是有一些資質不錯的公司，如上海滬鼎，上海滬鼎，上海滬鼎等等

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。

不過ELISA少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒zui低可測濃度。

5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢？

提出這個問題的朋友其實該打，目前上各個品牌的試劑盒生廠商，都會有其偏重點，像滬鼎生物在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。

Bender：粘附分子方面的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產品的試劑盒；

Merck(Linco)：內分泌研究方面的試劑盒；

Tips：

1、買Elisa試劑盒時，盡量先查文獻，通過文獻找品牌，再找供應商，找供應商就找正規代理商，千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中，復孔就是同一個樣品加到至少兩個孔中（一般3個或4個），zui后取其平均值作為樣品的讀數，這樣測得的結果才有說服力！

做復孔是為了較好的較少組內差異，如果血清不足不做復孔也可以。