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產(chǎn)品型號(hào):ALDH
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時(shí)間:2016-04-19
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
品牌 | R&D/美國(guó) |
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【產(chǎn)品名稱】:大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒
【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體
【貯 藏】:2-8°C
【有 效 期】:Elisa試劑盒二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購(gòu)買。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【標(biāo) 本】:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物
【質(zhì)量承諾】:我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高度信任。
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
【樣品采集】:Elisa試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
【保 質(zhì) 期】:半年(六個(gè)月)
一、大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
實(shí)驗(yàn)原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
二、大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
三、大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
四、大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測(cè)目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測(cè)到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化
五、大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒常見問題解答
小編簡(jiǎn)單整理了5個(gè)問題,具體內(nèi)容如下:
1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來算,定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè),zui多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本;48T的zui多30個(gè)樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?
96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請(qǐng)教一下,我想用elisa法測(cè)血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對(duì)自己包被(查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會(huì)不會(huì)比國(guó)產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心,可以自己購(gòu)買抗體對(duì)自己包被,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;
另外國(guó)內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯(cuò)的公司,如上海滬鼎,上海滬鼎,上海滬鼎等等
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。
不過ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。
5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢?
提出這個(gè)問題的朋友其實(shí)該打,目前上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商,都會(huì)有其偏重點(diǎn),像滬鼎生物在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常牛逼,而其他牌子也一樣的。
Bender:粘附分子方面的試劑盒;
Cayman:花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒;
Merck(Linco):內(nèi)分泌研究方面的試劑盒;
Tips:
1、買Elisa試劑盒時(shí),盡量先查文獻(xiàn),通過文獻(xiàn)找品牌,再找供應(yīng)商,找供應(yīng)商就找正規(guī)代理商,千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。
2、ELISA中,復(fù)孔就是同一個(gè)樣品加到至少兩個(gè)孔中(一般3個(gè)或4個(gè)),zui后取其平均值作為樣品的讀數(shù),這樣測(cè)得的結(jié)果才有說服力!
做復(fù)孔是為了較好的較少組內(nèi)差異,如果血清不足不做復(fù)孔也可以。