人單核細胞趨化蛋白3（MCP-3/CCL7）ELISA試劑盒

產品型號：MCP-3/CCL7

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2015-12-23

產品簡介：

人單核細胞趨化蛋白3（MCP-3/CCL7）ELISA試劑盒反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。

產品特性Product characteristics

品牌	R&D/美國

【名稱】：人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒

【規格】：48T/96T
【方法】：酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】：液態
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
【用途】：科研實驗
【貯存】：貯存于2℃-8℃.如有需要，我們將竭城為顧客提供售前，售中，售后的*服務!
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1）.細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2）分組：取出96孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。
3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復5 次，拍干。
7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。
8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內，以免影響準確性。
酶聯免疫試驗競爭法
競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下：
（1）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
（2）待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原醫學教丨育網整理的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫后，酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量。洗滌。
（3）加底物顯色：參考管中由于結合的酶標抗原zui多，故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒注意事項
1）實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2）加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。
3）孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4）反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5）建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋數。
6）建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒退換貨政策
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特別說明，以下情況不予辦理退換貨：
1、客戶在訂購產品時請仔細確認后再行訂購，由客戶選型失誤而造成的退貨需求，我方不承擔任何責任。產品大多性質較為特殊，存儲方式復雜，請用戶按照貯存條件說明妥善保存。
2、已超過受理期限的產品；
3、產品無標簽，或標簽已無法識別是否屬于我司試劑的產品；
4、密封產品原包裝打開，一次性封貼或膠條破損（質量問題除外）；
5、產品已使用（質量問題除外）；
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