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日期:2015-03-09瀏覽:787次
[導讀] 上海滬鼎公司專業(yè)技術(shù)員強調(diào):洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的,可以見得洗滌步驟的重要性。那么在ELISA實驗中如何應對洗滌步驟呢?看這里,掌握ELISA試劑盒洗滌的核心原則……
*、ELISA洗滌方式
[浸泡式]
1.吸干或甩干孔內(nèi)反應液;
2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
[流水沖洗式]
zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
第二、ELISA洗滌液的使用原則
1.某一項目的洗液建議使用該試劑盒內(nèi)的洗液;
2.同一elisa試劑盒洗液用完了,建議采用同一批號的洗液;
3.同一批號的洗液也用完了,建議采用同一項目的試劑洗液;
4.同一項目的洗液用完了,建議使用該項目其他廠家的洗液;
5.同一項目所有廠家都用完了,建議采用同一系列項目的洗液;
6.不建議國產(chǎn)洗液與進口洗液混用,也更不建議不同系列項目的洗液混用,這兩點都是因為洗液的配置成分不同,特別是不同項目的洗液,主要組分都不太一樣。
雖然對強陽性標本影響不是很大,但對于臨界陽性陰性(灰區(qū))標本影響較大,所以不提倡不同系列項目洗液混用。
在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎,各位親們要注意哦!上海滬鼎ELISA試劑盒提供全程技術(shù)指導服務及免費代檢測服務。
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