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日期:2016/1/27瀏覽:980次
培養基是我公司的主要產品線之一,在前面的技術分享內容中,相關培養基的制備方法、要求、保存、種類等也為大家介紹過不少。在今天的內容中,上海滬鼎生物公司為您帶來了的培養基制備流程,可以表示為:稱量藥品→溶解→調節PH值→溶化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。
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1.稱量藥品:根據培養基配方依次準確稱取各種藥品,放入適當大小的燒杯中,瓊脂不要加入。蛋白胨極易吸潮,故稱量時要迅速。
2.溶解:用量筒取一定量(約占總量的1/2)蒸餾水倒入盛有藥品的燒杯中,在放有石棉網的電爐上小火加熱,并用玻璃棒攪拌,以防液體溢出。待各種藥品*溶解后,停止加熱,補足水分。如果配方中有淀粉,則先將淀粉用少量冷水調成糊狀,并在火上加熱攪拌,然后加足水分及其他原料,待*溶化后,補足水分。
3.調節PH值:根據培養基對PH值的要求,用50g/LNaOH或5%(體積分數)HCl溶液調至所需的PH值。測定PH值可用PH試紙或酸度計等。
4.溶化瓊脂:固體或半固體培養基須加入一定量的瓊脂,將盛有培養基的器皿置于電爐上一面攪拌一面加熱,直至瓊脂*溶化后才能停止攪拌,并補足水分(水需預熱)。注意控制火力不要使培養基溢出或燒焦。
5.過濾分裝:先將過濾分裝裝置安裝好。如果是液體培養基,玻璃漏斗中放一層濾紙;如果是固體或半固體培養基,則須在漏斗中放多層紗布,或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾后立即進行分裝。分裝時注意不要使培養基沾染在瓶口或管口,以免浸濕棉塞,引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝量為管高的1/5,半固體分裝量一般以試管高度的1/3為宜,分裝三角瓶,以不超過三角瓶容積的一半為宜。
6.包扎標記:培養基分裝后加好棉塞或試管帽,再包上一層防潮紙,用棉繩系好。在包裝紙上標明培養基名稱、制備組別和實驗者姓名、日期等。
7.滅菌:上述培養基應按培養基配方中規定的條件及時進行滅菌。普通培養基為121℃,20min,以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成分。如需要作斜面固體培養基,則滅菌后立即擺放成斜面。斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜;半固體培養基滅菌后,垂直冷凝成半固體深層瓊脂。
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