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日期:2014-09-12瀏覽:1865次
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根據Lequin追述了EIA/ELISA技術的發展,從60年代該技術的提出,到后來該項技術在生物化學分析領域的廣泛應用。當我們在Oranon開始我們的計劃時,我們并沒有想到該技術能奠定將來數以億計的實驗室分析基礎。我們開展這個項目的初衷只是由于當時Oranon管理部門熱衷于多年前免疫化學診斷妊娠的成功。
但是由于工程太大,需耗時較多而阻止了該項技術的的深入發展。以一種簡易的可以根據顏色變化而即插即讀的試紙條作為基礎,似乎可以取得進一步的成功。所以,當Schuurs提出將酶附著于抗原或者抗體,通過化學反應的測定終產物顏色這一設想時,大家都表示了贊同。當然,我們采用了分析妊娠HCG來作為我們研究的模型。盡管如此,Schuurs對于這項技術將來的應用仍然非常清楚。正象他在試驗建議的zui后一句話所說的那樣:我認為,探索這項技術所取得的任何成功,都將開辟免疫學診斷的新領域。
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我們早期的研究還是取得了一定的成績,至少在試驗原理上,但是當我們發展以EIA技術為基礎的根據顏色變化而診斷妊娠的即插即讀的技術時,我們還是失敗了,雖然我們竭盡全力。將許多必需的試劑壓縮到一個試紙條上,并且在模板上使反應過程標準化,在哪個時間看起來還需要解決很多技術問題。實際上,在Oranon研究組發現了溶膠顆粒免疫測定技術發明后,依靠顏色變化診斷妊娠的問題也就變得可行了。取而代之的,我們轉移到了其他應用方面。
同時,我們也注意到了Engvall和Perlmann以及隨后的學者開展的關于ELISA和EIA的研究,我們zui感興趣的應用領域是細菌、寄生蟲和病毒,尤其是London的Voller、Bidwell以及荷蘭國家公共衛生研究所的Ruitenberg所做的工作。我們也意識到和當時比較笨拙的方法如免疫熒光,血清凝集實驗,補體結合實驗相比,ELISA和EIA法的簡易性使其在廣泛的微生物感染診斷中獲得了快速的發展。這就迅速為大家所接受,并且促進了眾多的生物醫學實驗室和第三世界的國家建立了一種可靠的感染性疾病診斷方法。當時,這種方法只被局限地應用于少數高度專業的實驗室。Voller和Bidwell首先應用了96孔微板用于EIA/ELISA實驗,由此也引發了*次免疫分析自動化的浪潮。我們在Oranon也輕易地接受了該方法用于檢測乙型肝炎和其他獻血篩查項目。
EIA和ELISA在內分泌學和腫瘤學方面的應用較感染性疾病要慢得多,因為在這些領域,RIA法已是捷足先登。EIA和ELISA技術的性和靈敏度都落后于已經較成熟了的RIA法。而且很多實驗室都已經配備了放射性核素的相關設備,并且習慣了與之開展工作,他們還不能意識到非同位素檢測的優勢。是自動化改變了這些,RIA的自動化牽涉到放射性同位素引起的容器和廢物處理問題,而EIA和ELISA卻使全自動隨機存取的免疫分析系統成為可能,該系統正是80年代診斷儀器商努力開拓的方向。這就導致了許多低成本的、設備簡單,可靠性強的免疫化學診斷方法從專業的放射性實驗室進入了普通化學實驗室。EIA和ELISA也因此找到了他在診斷感染性疾病以外的應用領域。
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