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日期:2024-04-29瀏覽:437次
一、血清的成分與作用血清的成分與作用
離體的血液凝固之后,經血凝塊聚縮釋出的液體-----血清。血清可以抗病毒,增強抵抗力血清屬于生物制劑,小牛血清含在離開母體后自身產生的一些代謝物質,當然也包括一些生長激素,而胎牛血清絕大部分的物質來自于母體。
血液凝固析出的淡透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血-塊收縮,其周圍所析出淡透明液體即為血清。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些都是與血漿所區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析都以血清為樣品。
血清細胞培養的發展,培養基的質量又是關鍵,而培養基的主要成分中動物血清對細胞的生長繁殖發揮著難以替代的作用,血清是醫藥生物技術產品中重要的原材料之一。保證血清質量也是促進生物制品質量提高的重要環節。
二、血清的主要成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題:
1.血清的成分可能有幾百種之多,目前對其準確的成分、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;
2.血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制;
3.不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化"的原因之一。
三、血清種類
目前用于組織培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。
選擇用牛血清培養細胞的原因:
1.來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都適合,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。
2.牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成分。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清品質高,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。
3.血清主要作用:
1)提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。
2)提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
3)提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
4)對培養中的細胞起到某些保護作用:如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。胰蛋白酶已被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用,血清還含有一些微量元素和離子。
5)提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。