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日期:2019-07-05瀏覽:890次
ELISA試劑盒的操作法,您做對了么?
上海滬鼎生物科技有限公司常年供應ELISA試劑盒,為確保試驗的成功,使用ELISA試劑盒時一定要注意相關的事項,今天,我們主要介紹人白介素ELISA試劑盒操作步驟。
1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目。
2. 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。
3. 酶標板加上蓋,37℃反應90分鐘。
4. 反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應,反應過程中,要經常的觀察,當肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應長不要超過30分鐘)。
10. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。
11. 根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應該×N。
上海滬鼎生物科技有限公司是國內ELISA試劑盒供應商,代理銷售不同ELISA試劑盒品牌的進口/國產ELISA試劑盒,專業供應科研實驗所需的培養基,抗體,動物血清血漿,標準品對照品,化學試劑,酶聯免疫試劑盒,白介素試劑盒,金標檢測試劑盒,微生物,蛋白質,ELISA種屬涵蓋廣,憑借多年行業經驗,完善的售后服務,高質量的產品。
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