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日期:2019-02-28瀏覽:6845次
生物科技中我們離不開單抗體和多抗體。單抗多抗各有優勢,單克隆抗體檢測任一抗原上的一個表位,多克隆抗體能識別任一抗原上的多個表位,下面是上海滬鼎生物科技有限公司向您對單抗和多抗的優缺點做以下展示:
一、單克隆抗體
1.優點:
①雜交瘤制得后,就成為了恒定的再生源,所有批次都將相同–對確保實驗步驟和結果的一致性和標準化非常有幫助。
②單克隆抗體通常在切片和細胞染色造成的背景較低。因為它們以更強特異性檢測一個靶表位,所以不太可能與其它蛋白質發生交叉反應。
③由于具有特異性,單克隆抗體非常適于用作分析測定中的一抗,或者用于檢測組織中的抗原,并且通常所產生的背景染色顯著低于多克隆抗體。
④與多克隆抗體相比,單克隆抗體的同質性非常高。如果實驗條件保持不變,單克隆抗體的各實驗結果重現性很高。
⑤單克隆抗體的特異性能使其在混合物中和抗原地結合。
2.不足之處:
①可產生大量特異性抗體,但是可能特異性過強。
②經過抗原的化學處理后比多克隆抗體更易于丟失表位。這可通過使用同一抗原的兩個或多個單克隆抗體進行補償。
3.客觀事實:
①僅檢測抗原上的一個表位。
②它們僅由一個抗體亞型組成。在需要二抗進行檢測時,應針對正確的亞類選擇抗體。
4.抗體制備:
①需要高技術。
②需要先培訓才能使用技術。
③制備雜交瘤耗時長。
二、多克隆抗體
1.優點:
①多克隆抗體可有助于放大低表達水平的靶蛋白信號,因為靶蛋白可在多個表位上結合不止一個抗體分子。但是這會給定量實驗造成不利影響,因為結果將變得不準確。
②由于能識別多個表位,多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結果。
③比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。
④它們會識別出與免疫原蛋白質具有高同源性的蛋白質,或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白,例如當未測試物種中的抗原性質未知時,有時會使用多克隆抗體。這也使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應性非常重要。
⑤多克隆抗體通常是檢測變性蛋白質的選擇。
⑥多表位通常可提供更為有力的檢測。
⑦多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結構域,因為抗血清通常可識別多個結構域。
2.不足之處:
①易于產生批次間差異。
②產生大量非特異性抗體,有時可能在某些應用中產生背景信號。
③多表位使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應性非常重要。
3.客觀事實:
①識別任一抗原上的多個表位。獲得的血清將包含不同親和力抗體的異質復合體混合物。
②多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。
③肽免疫原通常用于產生靶向wei一表位的多克隆抗體,特別適合高同源性的蛋白家族。
4.抗體制備:
①制備所需技術和技能不高。
②制備時間短。
③多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結構域,因為多克隆抗血清通常可識別多個結構
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