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2020-07-01
把細胞養好的三個關鍵要素是:良好的細胞來源,正確的實驗操作,以及合適的培養體系。其中“合適的培養體系”就是要創造適合細胞生長的環境,給細胞建立一個滿意的“家”。細胞培養基本條件:1.合適的細胞培養基合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2.優質血清目前,大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。3.無菌...2020-06-10
顆粒性抗原與相應抗體結合,在電解質參與下所形成的肉眼可見的凝集現象,稱為凝集反應。其中的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。在該反應中,因為單位體積抗體量大,做定量實驗時,應稀釋抗體。1.直接凝集反應玻片凝集法:是一種常規的定性試驗方法。原理是用已知抗體來檢測未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有痢疾桿菌抗體的血清與待檢菌液各一滴,在玻片上混勻,數分種后若出現肉眼可見的凝集塊,即陽性反應,證明該菌是痢疾桿菌。此法快速、簡便,但不能進行定量測定。試管凝集法:是一種定量試驗方法。多...2020-05-21
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。如何擇取胎牛血清的質量:1、內毒素標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍。可見,內毒素含量偏高不影響質量,除非含...2020-05-19
ELISA試劑盒的保質期一般都是在一年,假設保存妥當的話,不會出現疑問的。但不要重復凍融。當然假設是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等,應當放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結后一次用完。已開封或許運用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,ELISA查看試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免濕潤。但要留意的是,假設將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就當即運用的話,也許會影響,其直接的效果是對一些弱陽性標本的查看出現假陰性。建議:先從冰箱...2020-05-13
ELISA試劑盒價格加樣時的防錯小經驗(1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區分。(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區別(3)在標本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產生小氣泡,也可以加以區分ELISA試劑盒試驗的操作方法:(1)將抗原按一定的梯度倍比稀釋后,按照ELISA從上到下(或者從左到右)的順序包被。(2)將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA從左到右或者從上到下加入。(3)二抗的...2020-04-28
污染向來是在細胞培養中的大問題。預防或治理污染是細胞培養成功的關鍵因素。我們在細胞培養時,在開始階段就要十分重視污染問題,否則會前功盡棄,這樣不僅浪費時間,也會浪費人力、物力。(一)有哪幾類污染?在細胞培養過程中的污染不只是指微生物,而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質,包括生物和化學物質。1、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染,即使在細胞培養液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假...2020-03-31
在ELISA試劑盒實驗中常見原因如下:a)可能原因:加樣本及試劑量不準;孔間不一致;解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密。重復某一樣品時,加樣時間盡可能與在次接近;重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻。b)可能原因:加樣過快,孔間發生污染;解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。c)可能原因:加錯樣本;解決方法:檢查記...